1527年,神羅皇帝查理五世大軍(法國弗朗索瓦一世的宿敵)入義大利趕走了美地奇家族的教皇的手下(教皇住在羅馬),又把美地奇家族另外一個人亞歷山大請回來當大公,共和國沒有恢復激起民憤,於是亞歷山大被他的表弟小羅倫佐殺死(1537年),嫡系滅亡