化學品毒物快速檢測方法-骨髓細胞微核實驗

骨髓細胞微核實驗，是短期致突變實驗方法之一，其目的是用來檢測化學物是否具有致突變作用；是用於染色體損傷和干擾細胞有絲分裂的化學毒物的快速檢測方法。

當外來化學物干擾細胞的有絲分裂或使染色體發生斷裂損傷，使細胞在有絲分裂後期受損的染色體或其片斷不能及時進入細胞核，而留在細胞質中，形成大小為主核1/20至1/5的微核。骨髓嗜多染紅細胞為剛剛成熟排出主核的細胞，細胞中如果有微核形成則會很清晰觀察到。

由於微核是骨髓細胞染色體斷裂後產生，所以

骨髓細胞微核試驗

可用來檢測

化學物是否具有致突變作用

。

中科檢測

具有GBZ/T 240。11-2011 化學品毒理學評價程式和試驗方法 第11部分：體內哺乳動物骨髓嗜多染紅細胞微核試驗的相關檢測資質，能夠出具專業的第三方檢測報告。具體實驗方法和步驟如下：

試驗方法及步驟

（一）實驗動物的處理：

1、一般不用大鼠而用小鼠，體重在20 - 24克，雌雄均可。 每組動物10只可設3 - 4個劑量組，同時設陰性對照組和陽性對照組。

2、染毒推途徑依受試物定，選擇與人時間接觸方式相似，本實驗選取腹腔注射。

3、染毒劑量以LD50的1/5-1/50為好， 給藥採取24小時本實驗採用昆明種小鼠設三個染毒組和陰性個對照組和一個陽性對照組，連續染毒4天（或24h二次染毒），於染毒後第5天（或第二次染毒後6h）脫頸椎處死動物。取胸骨（或股骨）。

（二）微核分析片準備：迅速取胸骨及部分肋骨用刀片剔除肌肉組織及表面結締組織，沿胸骨

剪掉多餘肋骨，用濾紙或紗布將胸骨擦淨。取載波片，標記後，用滴管取小牛血清在載波片一端滴一滴小牛血清。剪去骨骺端，用彎止血鉗將骨髓擠至盛有一-滴小牛血清的玻片上，混勻，用推片將其推成薄厚均勻的片子、自然乾燥。

（三）固定：片膜幹後用甲醇固定15min，晾乾。

（四）染色：乾燥後用吸管吸取10%Giemsa染液滴滿載玻片，染色10-15min。染色完畢，自來水沖洗載波片背面，幹後鏡檢。

（五）結果觀察與計算：

先於低倍鏡下選擇細胞分佈均勻、染色均勻，細胞無損區域，再在油鏡下計算500個嗜多染細胞的微核率。

微核的辨認：微核大多數呈圓形，單個的，邊緣光滑整齊，嗜色性與核- -致，吉姆薩染色厚呈蘭紫色或灰蘭色，偶爾有橢圓形、腎形、馬蹄鐵形、環形。一個細胞中出現兩個或更多的微核，仍按一個計算。

微核出現率%=微核出現個數/細胞數X 100

（六）結果評價

將各組微核率進行X2檢驗，判斷其影響程度，還可進行劑量反應關係評價。