常用緩衝液的配製-磷酸鹽緩衝液

一、磷酸鹽緩衝液

磷酸鹽

（Na2HPO4和NaH2PO4）是使用最廣泛，pH範圍最寬的緩衝鹽，它是二級解離，有兩個pKa值（NaH2PO4：pKa1=2。12，pKa2=7。21，Na2HPO4：pKa1=7。21，pKa2=12。32）。

配製酸性緩衝液用NaH2PO4，pH範圍1-4。

配製中緩衝液用混合的兩種緩衝鹽，pH範圍6-8。

配製鹼性緩衝液用Na2HPO4，pH範圍10-12。

磷酸鹽緩衝液的配製表如下所示

通常情況下，用鉀鹽比鈉鹽效果更好，因為低溫下鈉鹽難溶而鉀鹽易溶，但若配製SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳緩衝液時只能用鈉鹽，因為鉀鹽會與SDS形成難溶的十二烷基磺酸鉀。

磷酸鹽緩衝液的優缺點：

優點：

①能配製成各種濃度 的緩衝液②適用的pH範圍寬③pH受溫度影響小④緩衝液稀釋後，pH變化小，稀釋10倍，pH變化僅為0。1。

缺點：

①易與常見的鈣鎂離子及金屬離子締合成沉澱②會抑制某些生物化學過程，抑制多數酶的活力，包括激酶、磷酸化酶、脫氫酶和以磷酸酯為底物的酶的催化作用都會產生某種程度的抑制作用。