如何利用NCBI Blast比對測序結果是否正確？

如何利用NCBI Blast比對測序結果是否正確？(請勿轉載)

材料：

①NCBI Blast網址：

https：//

blast。ncbi。nlm。nih。gov/

Blast。cgi？PROGRAM=blastn&PAGE_TYPE=BlastSearch&LINK_LOC=blasthome

②pUC19-M13F（-47）：金唯智M13F（-47）正向引物測序結果；

③Addgene下載的pUC19序列（標準序列）；

方法（詳細操作步驟）：

①點選上述網址，勾選“Align two or more sequences”：

②在“Enter Query Sequence”中輸入金唯智M13F（-47）正向引物測序結果（正反向均可，NCBI比較智慧，可以自行調整）：

③在“Enter Subject Sequence”中輸入Addgene下載的pUC19序列：

④ 繼續下滑，“Program Selection”選擇“Optimize for Highly similar sequences （megablast） ”：

⑤點選“Blast”，開始分析：

⑥程式執行，可能需要幾分鐘：

⑦比對結果：

點選“Description”檢視“Per。Ident”：

100%

表明query sequence完全匹配到subject sequence中。

點選“Graphic Summary”檢視圖形結果： 此處完全匹配。

點選“Alignments”，檢視是否有

點突變

之類，此比對結果將測序結果鹼基序列一一對應到Addgene-pUC19序列中（標準序列）。